一、保藏目的与重要性
微生物菌种保藏旨在长期保持微生物的生物活性与遗传稳定性,为科研、教学、工业生产等提供可靠资源。通过科学的保藏方法,确保菌种在一定时期内保持其原有的生物学特性,防止退化、变异或丧失活力,有利于生物技术研究与开发的持续进行。
二、保藏方法概述
1. 低温保藏法
(1)甘油法:将微生物在含甘油的培养液中生长,离心收集后与等体积无菌甘油混合,分装于冻存管中,置于-80℃冰箱或液氮中长期保存。
(2)冷冻干燥法:将微生物悬浮液冷冻干燥成粉末,封装于气密容器中,存放在-20℃或更低温度环境中。
2. 常温保藏法
(1)斜面保藏法:将微生物接种于斜面培养基上,放置于4℃冰箱中,定期转接以维持活力。
(2)沙土保藏法:适用于某些特殊菌种,将其与沙土混合,干燥后密封储存。
3. 深低温保藏法
(1)液氮保藏法:将微生物与保护剂混合后,迅速投入液氮或液氮蒸汽中,达到-196℃以下的超低温保藏。
(2)超低温冰箱保藏法:使用-80℃或更低温度的超低温冰箱进行保藏。
三、保藏操作流程
1. 菌种准备:选取活力旺盛、无污染的微生物菌株,进行适当纯化处理。
2. 保藏剂配制:根据所选保藏方法,配置相应的保藏剂(如甘油、冷冻保护剂等)。
3. 菌种处理:将菌种与保藏剂混合均匀,确保每单位菌体均被保藏剂包围。
4. 分装与标记:将处理好的菌种分装到适宜的容器中,清晰标注菌种名称、编号、保藏日期、操作人等信息。
5. 保藏设备预冷:将保藏设备(如冰箱、液氮罐等)提前降至所需保藏温度。
6. 菌种入库:将分装好的菌种放入预冷的保藏设备中,确保温度稳定。
7. 保藏记录:建立详细的菌种保藏记录,包括菌种信息、保藏方法、保藏日期、操作人等,便于后期查询与管理。
四、保藏注意事项
1. 菌种活性确定:保藏前应确保菌种活性和处于最佳状态。
2. 保藏条件监控:定期检查保藏设备运行状态,确保温度、湿度等条件符合要求。
3. 菌种转接与复壮:对于斜面保藏菌种,应定期进行转接与复壮,防止菌种衰退。
4. 生物安全:对具有生物安全隐患的菌种,应严格执行生物安全规定,防止泄露。
5. 备份保藏:重要菌种应进行异地或多种方法备份保藏,以防意外损失。
五、菌种保藏服务机构
专业的菌种保藏服务机构具备先进的保藏设施、专业的保藏技术团队和严格的质量管理流程,郑州方觉生物科技有限公司可为用户提供一站式菌种保藏服务,包括菌种接收、鉴定、保藏、管理、提供等。
六、法律法规与政策
遵循国家关于微生物菌种保藏的法律法规与政策,如《微生物菌种保藏管理办法》、《生物安全法》等,确保菌种保藏工作合法合规,保障生物资源的安全与合理利用。