一、微生物培养基

微生物培养基是微生物生长繁殖的物质基础，其组成、性质直接影响微生物的生长状态、代谢活动以及最终的培养效果。选择合适的培养基对于微生物的分离、鉴定、保藏以及特定功能的发挥至关重要。本指南旨在介绍常见微生物菌种的培养基种类、配方、制备方法及其用途，为科研、教学、生产等领域提供实用的参考信息。

二、常用菌种培养基列表

1. 营养琼脂培养基

适用对象：需氧菌的保藏。

主要成分：蛋白胨（10g）、牛肉膏（3g）、氯化钠（5g）、琼脂（15-25g）和蒸馏水（1000ml）。

制备方法：（1）将除琼脂之外的所有组分融入蒸馏水之中，接着向其中添加约2ml的15%浓度氢氧化钠溶液，以调整混合液的pH值至7.2至7.4这一适宜区间；（2）将琼脂加入其中并持续加热直至完全溶解；（3）待琼脂溶解完成后，将制备好的培养基进行分装，并在121℃的条件下实施高压灭菌处理，灭菌时长为15分钟。

2. 土浸出液琼脂培养基

适用对象：芽孢杆菌的保藏。

主要成分：蛋白胨（5g）、牛肉膏（3g）、琼脂（15g）以及富含微生物生长因子的土壤浸出液（1000ml）。

制备方法：（1）取100克已去除杂质石头的干燥土壤，将其加入到960ml的清水中，整个混合物在121℃的条件下进行高压灭菌处理，持续时间设定为30分钟；（2）灭菌结束后，先使用棉布进行初步过滤，之后再通过滤纸进一步过滤以确保溶液纯净，对过滤得到的滤液进行二次121℃、20分钟的灭菌处理，此滤液将用于配制培养基；（3）将蛋白胨、牛肉膏和琼脂加入滤液中并加热使之完全溶解；（4）将制备好的培养基分装，并再次进行121℃、20分钟的高压灭菌，以确保无菌状态。

3. MRS培养基

适用对象：乳酸杆菌的保藏。

主要成分：蛋白胨（10g）、牛肉膏（5g）、葡萄糖（20g）、吐温-80（1ml）、磷酸氢二钾（2g）、乙酸钠（5g）、柠檬酸三铵（2g）、硫酸镁（0.2g）、硫酸锰（0.05g）琼脂（15g）和蒸馏水（1000ml）。

制备方法：（1）将各成分按照对应的量加入到蒸馏水中，使用加热设备对混合液进行加热，直到所有固体成分完全溶解；（2）将PH值调整至6. 2-6.6之间；（3）分装好的培养基容器放入高压蒸汽灭菌器中，设定为121℃，保持此温度下的高压灭菌状态持续15至20分钟。

4. 番茄汁培养基

适用对象：乳酸杆菌保藏。

主要成分：酵母膏（10g）、碳酸钙（15g）、蛋白胨（10g）、琼脂（11g）、PH为7.0的番茄汁滤液（200ml）和蒸馏水（800ml）。

制备方法：（1）选取新鲜番茄，洗净后切为小块（但注意不要捣碎），放入三角烧瓶内，将其置于4℃冰箱中静置8至12小时，之后取出烧瓶，使用纱布对番茄汁进行过滤，得到澄清的番茄汁滤液（若一次未能用尽全部滤液，可将其储存在0摄氏度冰箱中，最长可保持稳定品质达4个月，使用时只需将滤液取出在常温下自然升温至溶解状态即可）；（2）将包含番茄汁滤液在内的所有成分加入烧杯中，通过加热搅拌促使它们充分溶解，在溶解过程中，需使用pH计对溶液进行精确测量，并调整至pH值为6.8±0.2的范围内；（3）将制备好的培养基溶液分装入烧瓶中，然后放入高压灭菌器内，以121℃的温度进行15至20分钟的高压灭菌处理，以确保无菌条件；（4）在需要使用番茄汁培养基时，提前将已灭菌的培养基从冰箱中取出，将其加热至琼脂完全溶解，然后待其自然冷却至50摄氏度时，即可投入实验使用。

5. 乙酸杆菌保藏培养基

适用对象：乙酸杆菌的保藏。

主要成分：蛋白胨（5g）、葡萄糖（20g）、肝浸液（100ml）、碳酸钙（10g）、琼脂（20g）和蒸馏水（900ml）。

制备方法：（1）按照所需量称取牛肝，剁碎成小块，放入一只容器中，加入2000ml的蒸馏水，置于加热设备上，逐步升高温度至沸腾状态，并保持煮沸状态持续3小时，待肝浸液稍微冷却后，采用合适的过滤器材（如双层纱布、滤纸或专业过滤器）对煮沸后的混合液进行过滤，以分离出清澈的肝浸液，同时滤除残余的固体碎片和杂质；（2）将所有成分全部倒入一个洁净的烧杯中，烧杯置于加热设备上，适度加热并不断搅拌，直至所有固体成分完全溶解于水中；（3）放入高压灭菌器内，以121℃的温度进行15至20分钟的高压灭菌处理。

6. 高氏合成培养基

适用对象：放线菌的保藏。

主要成分：可溶性淀粉（20g）、氯化钠（0.5g）、硝酸钾（1g）、硫酸铁_FeSO4·7H2O（0.01g）、磷酸氢二钾（0.5g）、硫酸镁_MgSO4·7H2O（0.5g）、琼脂（20g）和蒸馏水（1000ml）。

制备方法：（1）将所有成分加入清洁的烧杯中，使用加热设备，对混合液进行加热，直至所有固体成分完全溶解于水中；（2）将pH值调整在7.2至7.4这一区间内；（3）将制备好的培养基溶液分装入适当的容器中，放入高压灭菌器内，以121℃的温度进行15至20分钟的高压灭菌处理。

7. 麦芽浸汁琼脂。

适用对象：观察酵母产生子囊孢子及保藏。

主要成分：麦芽浸膏（25g）、琼脂（15g）和蒸馏水（1000ml）。

制备方法：（1）将所有成分加入清洁的烧杯中，混合均匀；（2）放入高压灭菌器内，以121℃的温度进行10分钟的高压灭菌处理，留存备用。

8. 玉米粉琼脂培养基（CMA）

适用对象：假丝酵母、霉菌的鉴定和保藏。

主要成分：玉米粉（60g）、琼脂和（15-18g）和蒸馏水（1000ml）。

制备方法：（1）将玉米粉缓缓加入到准备好的适量蒸馏水中，使用搅拌器或手动搅拌棒充分搅拌；（2）玉米粉溶液置于炉灶上，以文火（即较低火力）进行加热，并保持煮沸状态持续1小时，然后沙布进行过滤操作，将悬浮液中的玉米粉颗粒及可能存在的杂质滤除，得到澄清的玉米粉浸出液；（3）加入琼脂，再次进行加热搅拌，直至琼脂完全溶解于溶液中，补充蒸馏水，确保最终溶液总体积达到1000ml；（4）将制备好的培养基溶液迅速分装入适当的容器中，放入高压灭菌器内，以121℃的温度进行20分钟的高压灭菌处理。

9. 马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）

适用对象：霉菌的分离培养和保藏。

主要成分：去皮切块的马铃薯（300g）、葡萄糖（20g）、琼脂（20g）和蒸馏水（1000ml）。

制备方法：（1）取新鲜马铃薯，去除外皮，切成适当大小的块状，加入到1000毫升的蒸馏水中，置于加热设备上，加热至沸腾状态，保持煮沸10至20分钟；（2）用双层纱布进行过滤，以去除马铃薯块和未溶解的固体残渣，得到澄清的马铃薯浸提液，用蒸馏水补足至最初的1000毫升；（3）加入葡萄糖和琼脂，继续加热搅拌至溶化；（4）将制备好的培养基溶液迅速分装入适当的容器中，放入高压灭菌器内，以121℃的温度进行20分钟的高压灭菌处理。

10. 察氏培养基

适用对象：青霉、曲霉鉴定及保藏。

主要成分：硝酸钠（3g）、磷酸氢二钾（1g）、硫酸镁_MgSO4·7H2O（0.5g）、氯化钾（0.5g）、硫酸亚铁（0.01g）、蔗糖（30g）、琼脂（20g）和蒸馏水（1000ml）。

制备方法：（1）将所有成分加入清洁的烧杯中，混合均匀，置于加热设备上至溶解；（2）将制备好的培养基溶液迅速分装入适当的容器中，放入高压灭菌器内，以121℃的温度进行20分钟的高压灭菌处理。

11. 菠菜-胡萝卜琼脂

适用对象：毛菌的保藏。

主要成分：菠菜（20g）、胡萝卜（20g）、琼脂（20g）和蒸馏水（1000ml）。

制备方法：（1）选取新鲜的菠菜和胡萝卜，洗净后分别切碎，一同加入至1000ml的蒸馏水中；（2）置于加热设备上，加热至沸腾状态，并保持煮沸状态持续1小时，稍微冷却后对混合液进行过滤；（3）向其中加入琼脂并重新加热，持续搅拌，直至琼脂完全溶解于液体中，用蒸馏水补足至最初的1000ml；（4）将制备好的培养基溶液迅速分装入适当的容器中，放入高压灭菌器内，以121℃的温度进行15分钟的高压灭菌处理。

三、培养基选择原则

1. 针对性：根据目标微生物的生理特性、营养需求选择专用或广谱培养基。

2. 抑制性：对于特定微生物的分离或抑制杂菌生长，可选用添加特定抑制剂的培养基。

3. 显色性：某些培养基含有特定指示剂，便于观察微生物生长情况或代谢产物。

4. 经济性：在满足实验需求的前提下，优先选择成本较低、易获取原料的培养基。

四、结论

正确选择和使用微生物培养基是微生物研究与应用的基础。熟悉各类培养基的特点与制备方法，结合实际需求进行合理选择，有助于提高实验效率，确保微生物培养的顺利进行。在实际操作中，应遵循无菌操作原则，确保培养基的质量，同时注意培养条件（温度、pH、气体环境等）对微生物生长的影响。